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SOD酶的活力的测定

SOD酶的活力的测定方法如下：直接法 原理是根据O2 或产生O2 的物质本身的性质测定O2 的歧化量，从而确定SOD的活性。经典的直接法包括：脉冲辐射分解法、电子顺磁共振波法（EPR）、核磁共振法。由于所需的仪器设备价格昂贵，一般较少应用。

超氧物歧化酶（SOD）广泛存在于动植物体内，是一种重要的抗氧化酶，用于清除超氧阴离子自由基。氮蓝四唑（NBT）法是测定SOD活性的一种常用方法。其原理是SOD能抑制NBT在光下的还原作用，进而减少蓝色甲腙的生成。NBT在560nm处有最大吸收，通过测量这一波长下的吸光度，可以计算出SOD的活性。

当被测样品中含有SOD时，则对超氧阴离子自由基有专一性的抑制作用，使形成的亚硝酸盐减少，比色时测定管的吸光度值低于对照管的吸光度值。如果用分光光度计，最好设定黑暗和照光作为对照。依据SOD能抑制氮蓝四唑（NBT）在光下的还原作用来确定酶活性大小。

测定方法很多，常见的有化学法、免疫法和等电点聚焦法。其中化学法应用最普遍，化学法的原理主要是利用有些化合物在自氧化过程中会产生有色中间物和O2 -，利用SOD分解而间接推算酶活力。

式中： A──对照管OD B──测定管OD V──反应液总量（ml）N──样品稀释倍 W──取液量 也可用酶比活法即以每管样品的百分抑制率从SOD标准曲线查出相应的SOD U/ml， 乘以稀释倍数（1ml/取样量）。若样品为组织匀浆液， 根据匀浆浓度或组织蛋白质含量， 将单位换算为U/g组织或U/mg蛋白。

每个试管最终的体积啊，因为是紫外测定吸光度，当然是所有体积了，不是比色皿的。你使用常量法还是微量法。举个例子吧，如果你是按照文献做的，325nm微量法总体积就是3ml，常量法总体积就是9ml。如果是酶样液体积，那就是你加入试管的SOD的体积，比如微量法就是0.01ml（10ul）。希望能帮助你。

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