pod测定值（pod测定中必须控制的测定条件）

原标题：pod测定值（pod测定中必须控制的测定条件）

导读：

pod测定吸光值减小1、过氧化物酶（POD）活性的测定过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶，它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系，因此pod测定吸光...

Pod 测定吸光值减小

1、过氧化物酶（POD）活性的测定过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶，它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系，因此pod测定吸光值减小。

2、测定过氧化物酶活性使用愈创木酚法，原理是在酶的催化下，H2O2aq与愈创木酚反应生成茶褐色产物。此产物在470nm波长下具有最大吸收值，通过紫外分光光度计测定吸光度，反推酶活性。实验每分钟读一次吸光度，因为酶促反应持续进行，产物生成导致吸光度变化。

3、.2到1。室温下，正常POD酶活性值为0.2到1。POD活性值低于正常值的可能是出现了病害。pod酶是广泛存在于各种动物、植物和微生物体内的一类氧化酶，以H2O2为电子受体直接氧化酚类或胺类化合物。

在测定pod活性的时候,要求反应时间内吸光度的变化,为什么

测定过氧化物酶活性使用愈创木酚法，原理是在酶的催化下，H2O2aq与愈创木酚反应生成茶褐色产物。此产物在470nm波长下具有最大吸收值，通过紫外分光光度计测定吸光度，反推酶活性。实验每分钟读一次吸光度，因为酶促反应持续进行，产物生成导致吸光度变化。

过氧化物酶（POD）活性的测定过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶，它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系，因此pod测定吸光值减小。

过氧化物酶催化H2O2氧化酚类物质，产生有色化合物。在愈创木酚法中，POD催化H2O2将愈创木酚氧化为红棕色的4-邻甲氧基苯酚，其470 nm处有高光吸收，因此可利用比色法测量其活性。实验所需材料包括各种果蔬，以及研磨设备、离心机、分光光度计等仪器，以及醋酸缓冲液、愈创木酚、H2O2等试剂。

pod酶活性测定方法有定时法、连续监测法、平衡法。定时法通过测定酶反应开始后某一时间段内（t1到t2）产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或物的变化。优点：简单易行，对试剂要求不高。

以1分钟内398nm吸光度上升0.01为一个酶活性单位，结果以U/mg蛋白或U/g鲜重表示。过氧化物酶（Peroxidase，POD）活性测定POD活性测定采用愈创木酚法（Lurie等，1997）。用酶标仪进行测定时按比例调整为总反应体积为400μL。

含2％的聚乙烯吡咯烷酮），研磨，4℃ 8000 r/min离心20 min，上清液定容至5 ml。 POD活性测定按Kraus和Fletcher（1994）方法进行3 ml反应混合液中含0.2％愈创木酚0.95 ml，50 mmol L-1 PBS（pH0）1 ml，酶液0.05 ml，0.3％过氧化氢1 ml。记录1 min内470 nm下的光吸收值变化。