测pod酶活性(pod酶活力值大概是)
原标题:测pod酶活性(pod酶活力值大概是)
导读:
计算pod活性时△470什么意思在波长为470nm处的变化。在计算POD活性时,△470指的是在波长为470nm处的吸光度变化。pod是一种生物酶,能够催化过氧化物分解,从而...
计算Pod活性时△470什么意思
在波长为470nm处的变化。在计算POD活性时,△470指的是在波长为470nm处的吸光度变化。pod是一种生物酶,能够催化过氧化物分解,从而保护细胞免受过氧化物的损害。通过测量样品在不同时间点的吸光度变化,可以评估pod的活性。
样品在波长为470纳米处的吸光度变化。POD是一种常用的生物活性指标,是反映细胞受到氧化损伤的程度,德尔塔470是通过比较样品和空白对照组的吸光度来计算得出的数据,因此,计算pod活性时德尔塔470是样品在波长为470纳米处的吸光度变化。
测定过氧化物酶活性使用愈创木酚法,原理是在酶的催化下,H2O2aq与愈创木酚反应生成茶褐色产物。此产物在470nm波长下具有最大吸收值,通过紫外分光光度计测定吸光度,反推酶活性。实验每分钟读一次吸光度,因为酶促反应持续进行,产物生成导致吸光度变化。
POD测定:酶液稀释10倍,取50uL待测液与2mL POD反应液和1mL 0.2mo1/L的磷酸二氢钾溶液反应,用紫外分光光度计于470nm处每隔30sec测其吸光值A470,重复3次求平均值,以△A470/min/gFW表示酶活大小。SOD(超氧化物歧化酶活性)的测定 试剂:① 0.05mol/l磷酸缓冲液(PH值为8)。
过氧化物酶催化H2O2氧化酚类物质,产生有色化合物。在愈创木酚法中,POD催化H2O2将愈创木酚氧化为红棕色的4-邻甲氧基苯酚,其470 nm处有高光吸收,因此可利用比色法测量其活性。实验所需材料包括各种果蔬,以及研磨设备、离心机、分光光度计等仪器,以及醋酸缓冲液、愈创木酚、H2O2等试剂。
又称为动力学法或速率法、连续反应法。在酶反应过程中,用仪器监测某一反应产物或底物浓度随时间的变化所发生的改变,通过计算求出酶反应初速度。连续监测法根据连续测得的数据,可选择线性期的底物或产物变化速率用于计算酶活力。因此连续监测法测定酶活性比定时法更准确。